文章导读

克日，南京农业大学园艺学院汪良驹教授团队研究论文“Study on the Mechanism of Exogenous 5-Aminolevulinic Acid (ALA) in Regulating the Photosynthetic Efficiency of Pear Leaves (外源 5-氨基乙酰丙酸 (ALA) 调理梨叶光合效率的机制研究)”在 Forests 期刊揭晓。该研究探讨了外源ALA提高梨树叶片光相助用的可能机制，为ALA在梨树生产应用上提供了理论依据。

研究历程与效果

5-氨基乙酰丙酸 (ALA) 是一种新型植物生长调理物质，在植物生产中能够起到多种调理作用，其中ALA提高植物光相助用效应尤为引人关注。2023年，汪良驹教授研究团队制订并宣布了《5-氨基乙酰丙酸 桃树施用手艺规程》团标 (TJAASS 88—2023)，规范了ALA在桃上应用标准。但这个规程是否适用于其它树种尚不清晰，ALA提高植物叶片光合效率的内在机制更需要深入研究。因此，作者以盛果期‘西岳’梨为质料，参照TJAASS 88—2023要求，在果树着花前一周用ALA稀释液灌根防寒、在盛花后期喷花以去除过多花朵的基础上，于幼果发育期叶片喷施ALA溶液，探讨ALA对梨树叶片光合能力的影响，通过叶片气体交流参数、叶绿素快速荧光特征以及叶绿素合成、光合系统II电子转达载体相关基因表达中剖析，以期阐释ALA对梨叶片光相助用的调控机理。

1. ALA处置惩罚显著增进梨叶片净光合速率 (Pn) 等光合气体交流参数

梨树叶片喷施外源ALA后1周，叶片Pn就显著高于比照。这种效应至少一连5周。5周间，ALA诱导的净光合速率 (Pn) 平均增幅29.28% (图1A)，ALA处置惩罚叶片蒸腾速率 (Tr) 平均比比照横跨13.94% (图1B)。与此类似，ALA处置惩罚后梨叶片气孔导度 (Gsw) 整体上比比照横跨18.73% (图1C)。并且，梨叶片瞬时羧化效率 (Pn/Ci) 总平均值比比照增添32.30% (图1E)，水分使用效率提高11.16% (图1F)。由此可见，ALA处置惩罚提高梨树叶片光合性能至少可以坚持3~4周。

图1. ALA处置惩罚对梨叶片光合气体交流参数的影响。

2. ALA处置惩罚显著增进梨叶片内源ALA的合成与代谢

研究效果显示，外源ALA处置惩罚可以诱导梨树叶片内源ALA含量增添。在ALA处置惩罚后5周内，外源ALA诱导的内源ALA含量增幅达41.99% (图2A)。在此历程中，外源ALA处置惩罚一方面显著提高内源ALA合成能力，5周内的平均值提高54.54% (图2B)；另一方面，在ALA处置惩罚后第2周外源ALA处置惩罚增进梨叶片内源ALA代谢剖析。这意味着，外源ALA喷施梨叶片不但增进内源ALA合成，并且增进ALA代谢。外源ALA对内源ALA合成的增进效应至少坚持5周。

图2. 外源ALA对梨叶片内源ALA含量 (A)、生物合成 (B) 和代谢能力 (C) 的影响。

3. ALA处置惩罚显著增进梨叶片光合色素的合成

如图3A所示，ALA处置惩罚后第二周最先，处置惩罚叶片叶绿素相对含量 (SPAD) 均显著高于比照。从图3B-D看，ALA处置惩罚1周后梨树叶片叶绿素a、叶绿素b以及叶绿素总量均显著高于比照。只管第2周两者Chl b含量没有差别，但其它时间点的差别均抵达显著水平，说明ALA处置惩罚增进梨叶片叶绿素积累，缓解其含量下降。详细来说，ALA处置惩罚叶片五周内Chl a、Chl b和叶绿素总量的平均值划分比比照横跨11.38%、8.59%和10.44%。另外，ALA增进提高梨叶片Chl a/b比值，说明ALA增进叶片叶绿素a积累，但倒运于a转化为b。与此类似，ALA处置惩罚也可以增进叶片类胡萝卜素 (Car) 含量上升 (图3F)，且五周平均值比比照横跨16.25%。

图3. ALA处置惩罚对梨叶片光合色素含量的影响。(A) 叶绿素相对含量、(B) 叶绿素a、(C) 叶绿素b、(D) 总叶绿素含量、(E) Chla/b比值、(F) 类胡萝卜素含量。

4. ALA处置惩罚对叶绿素合成相关基因表达的影响

为探讨外源ALA提高梨叶片叶绿素含量的机理，作者剖析了叶片喷施ALA后与ALA以及叶绿素生物合成相关的主要基因相对表达量？梢钥闯，催化ALA合成的两个要害基因HEMA和GSA相对表达量在外源ALA处置惩罚后显着上调。并且，ALA处置惩罚的叶片HEMF基因表达量至少在4周内显著高于比照。类似的情形泛起在HEMG (催化原卟啉原Ⅸ天生原卟啉Ⅸ) 和CHLH (催化原卟啉Ⅸ螯合Mg2+天生Mg-原卟啉Ⅸ)。CHLH是控制叶绿素生物合因素支的一个基因。从图中看，ALA处置惩罚第1周叶片CHLH相对表达量显著高于比照。这种效应可以维持3周。从整体上看，ALA增进其自身合成、代谢以及转化为叶绿素的编码基因表达，特殊是处置惩罚后4周内，大都基因表达均受到差别水平上调。

图4. 叶绿素生物合成途径及ALA处置惩罚对梨叶片相关基因表达的影响。

5. ALA提高叶绿素合成要害基因PypHEMA和PypCHLH的启动子活性

为了进一步探讨ALA调控叶绿素合成机制，作者通过在烟草中举行的GUS染色实验研究ALA对叶绿素合成历程中要害基因启动子的影响。效果批注，外源ALA可以显著增强PypHEMA和PypCHLH基因启动子活性。因而，外源ALA处置惩罚可能通过上调内源ALA合成要害基因HEMA和叶绿素合成要害基因CHLH启动子活性，增进基因表达，从而导致梨叶片叶绿素含量提升。

图5. 外源ALA对ALA和叶绿素合成相关基因启动子活性的影响。

6. 外源ALA处置惩罚对梨叶片PSII相关基因的影响

作者在叶绿素快速荧光曲线中视察到ALA对梨叶片PSII反应中心 (PSII-RC) 光合电子转达效率的增进作用。为了探讨其作用机制，作者还检测了ALA处置惩罚后5周内PSII-RC主要成员编码基因在梨叶片中的相对表达量。效果批注，ALA处置惩罚可以通过增进PSII-RC焦点结构卵白和其他功效小分子卵白编码基因的表达，来维持PSII反应中心的稳固性，增进植物光相助用。

图6. PSII反应中心结构及ALA处置惩罚对梨叶片相关基因表达的影响。

研究总结

本文参照TJAASS 88—2023团标《5-氨基乙酰丙酸 桃树施用手艺规程》要求用ALA处置惩罚梨树，至少可以在3周以上时间内维持较高的叶片光合效率，并且这种效应可以体现在多个方面。在叶绿素合成历程中，外源ALA不但可以增进内源ALA合成与代谢，还可以增进叶绿素合成，增添光合色素含量；在光合电子转达历程中，ALA增进梨叶片PSII-RC焦点卵白基因表达，提高PSII-RC活性，增进光合电子转达和能量转化。作者的研究证实晰TJAASS 88—2023标准也适合于梨树。并且，没有展示的数据批注，ALA处置惩罚过的梨单果重增添19.7%，果实可溶性糖含量提高14.5%。这些效果为ALA在梨生产上应用提供了理论依据。